牡丹根提取液抗氧化作用的研究

1、牡丹根提取液抗氧化作用的研究黄海霞,付强,陈晓,常圣鑫,张晓彤,刘美佳【摘要】目的为开发牡丹在天然抗氧化剂和医药保健等相关领域的应用提供必然的理论和实验根底.方式以洛阳红、状元红、凤丹白和乌龙捧盛4个品种牡丹根为材料,研究了95温醇提取物在口,%-二苯-(3-苦味月井(DPPH)自由基体系、 卵黄脂蛋白不饱和脂肪酸(PUFA)体系、 邻苯三酚自氧化体系中的抗氧化活性,对照分析不同品种牡丹的抗氧化成效.结果不同品种牡丹根提取液均具有较强的去除DPPH自由基的水平,对卵黄脂蛋白PUFAt氧化和邻苯三酚自氧化也具有必然的抑制作用,且随着提取液浓度的升高抗氧化成效越好.结论牡丹根提取液有较好的抗氧化水

2、平,具有必然的药用价值.【关键词】牡丹；抗氧化水平；,%-二苯-(3-苦味月井自由基；不饱和脂肪酸；邻苯三酚丹皮是毛11科芍药属植物牡丹PaeoniasuffruticosaAndr.的根皮.丹皮味苦辛,性凉,富含丹皮酚等多种生物活性物质,有清热、 凉血、 镇痛和消瘀等成效.最近几年来,随着对牡丹研究的不断深切,大量研究说明它还有抗炎、 抗衰老及保肝、爱惜心脏、抗肿瘤的作用,具有良好的药理活性1.目前,牡丹根皮正作为一种传统中药被日趋重视,并在医药、 香料、 化学等领域普遍开发.本研究以洛阳牡丹品种为研究对象,采纳有机溶剂法提取牡丹根皮中的活性成份,运用多种分析方式探讨牡丹根醇提液的抗氧化水平

3、,对照分析不同浓度醇提液的抗氧化作用成效,为天然抗氧化剂的研究和应用奠定必然的理论和实验根底.1材料洛阳红、状元红、凤丹白、乌龙捧盛4个牡丹品种约35年的根,于2022-11中旬采自洛阳国际牡丹园.将牡丹根洗净后抽去其髓部,置于烘箱内30c烘干,用粉碎机将其磨成粉末,过40目金属筛,置入棕色广瓶中保存备用.2方式提取液的制备准确称取牡丹根皮粉末g置入枯燥的三角瓶中,加ml95%乙醇,摇匀,密封后40c恒温振荡水浴提取2h.然后转移至离心管中,4000r/min离心10min,搜集上清液于4c下冰箱保存备用.牡丹根提取液抗氧化水平的测定DPPH法2测定牡丹根提取液的抗氧化水平精准移取不同浓度稀释

4、液ml于试管中,再参加ml2X10-4mol/LDPPH溶液,摇匀,室温放置30min,测定A517,即为A样品 用ml乙醇与ml样品溶液混匀后调零,以排除试样本身颜色的阻碍.向ml乙醇中参加mlDPPH液,测定A517,即为A对照.依照公式得样品去除率刀：去除率刀%=A对照-A样品/A对照X100%AOA法3测定牡丹根提取液的抗氧化水平成立以Fe2+诱导卵黄脂蛋白多不饱和脂肪酸发生脂质过氧化反映为模型.精准移取1：25稀释的卵黄悬液卵黄用等体积pH,mol/LPBS配成,利用前用磁力搅拌器搅拌10minml,不同浓度的提取液ml、25mmol/LFeCl2溶液现配现用ml,用PBS补足ml,

5、即为样品管.对照管除不加样液外其它试剂同前.将上述两种试管同时置于37C水浴中振荡5h,掏出后,参加质量分数为20%TCAml终止反映,静置10min后,3500r/min离心10min;取ml上清液,参加质量分数为%TBA溶液ml,滚水浴15min,冷却,测定A532用pHPBS调零.样品抗卵黄脂蛋白PUFACt氧化的抑制率：抑制率=A对照-A样品/A对照X100%邻苯三酚自氧化法4测定牡丹根提取液的抗氧化水平取50mmol/LpHTris-HC1缓冲液ml力口ml不同浓度的提取液,于25c保温10min;参加25c预温的5mmol/L邻苯三酚ml,混匀后迅速测定A327 以等体积10mmo

6、l/LHC1代替邻苯三酚溶液为空白调零,对照组以等体积甲醇代替样液,每隔10s测定1次,持续测定150s.作吸光度随时刻转变曲线的回归方程,其斜率为邻苯三酚的自氧化速度V,按下式计算样品对O2-的抑制率.抑制率=V对照-V样品/V对照X100%式中：V对照一对照组邻苯三酚自氧化速度A/sV样品一样品组邻苯三酚自氧化速度AA/s3结果牡丹根提取液去除DPPH自由基的水平禾用DPPH勺褪色效应,测定波长为517nm处吸光度值的下降计算不同浓度牡丹提取液对DPPH自由基的去除率,同时比拟不同品种间对DPPHS由基的去除能力.结果见表1.表1不同品种牡丹提取液对DPPH1由基的去除水平的阻碍由表1可知

7、,牡丹根提取物对DPPH1由基具有较强的去除水平,其去除水平与提取液浓度之间显示出良好的剂量-效应关系,即随着牡丹根样品提取液浓度的增加,对DPPHI由基的去除水平慢慢增强,说明牡丹根提取液均具有较好的抗氧化成效,其中“洛阳红的作用成效要优于其他的品种,当浓度为40g/L时,对DPPH自由基的去除率到达90姒上；“乌龙捧盛对DPPHI由基的去除水平较弱.牡丹根提取液抗卵黄脂蛋白PUFM氧化的水平采纳Fe2+诱导卵黄脂蛋白多不饱和脂肪酸发生脂质过氧化反映为模型,测定不同浓度提取液对脂质过氧化的抑制作用见表2.不同浓度的牡丹根提取液均表现出必然的抗卵黄脂蛋白PUFA过氧化的水平,随着牡丹根提取液浓

8、度的增加,对卵黄脂蛋白PUF侬生过氧化的抑制作用慢慢增强.浓度为4g/L的牡丹提取液对卵黄脂蛋白PUFAi氧化的抑制率可达至U50姒上,“状元红对卵黄脂蛋白PUFA过氧化的抑制水平明显高于其他品种.表2不同浓度牡丹提取液对卵黄脂蛋白PUFAt氧化抑制水平的阻碍牡丹根提取液对02一的去除水平邻苯三酚在碱性条件下自氧化,释放出02-,生成有色的中间产物,可用分光光度法测定波长为327nm的吸光值.不同品种牡丹提取物对02-去除水平的阻碍见表3.表3不同品种牡丹提取液对O2-的去除水平的阻碍由表3能够看出,当有牡丹提取液存在时,可去除O2一从而阻止中间产物的积存,使邻苯三酚自氧化速度降低,表现为体系

9、的吸光度降低.4个牡丹品种对超氧阴离子均有必然的去除水平,且各品种的抗氧化作用到达极显著性不同P<.4讨论DPPK、AOA1及邻苯三酚法已被普遍用于植物材料的抗氧化水平的评判和抗氧化剂的挑选,是一种快速、简便和灵敏的评判植物抗氧化水平的可行方式5,6.通过3种抗氧化指标的测定,结果说明不同品种牡丹根提取液均具有较强的去除DPPH1由基的水平,对卵黄脂蛋白PUFAt氧化和超氧阴离子也具有必然的抑制水平,且抗氧化水平与提取液浓度之间呈现出良好的剂量依托效应.为挑选高抗氧化活性的牡丹品种,对照分析了不同品种牡丹的抗氧化作用成效,但不同的抗氧化指标取得的结果不尽相同,可能是由于应用体外抗

10、氧化体系所用自由基诱导剂的性质和剂量各异,检测结果有必然的不同.因此还需对挑选出来的抗氧化活性高的样品与传统的抗氧化剂进行比拟,即进行抗氧化效劳的测定7.另外,牡丹中的各类天然抗氧化成份往往具有协同效应,这一因素也会阻碍其抗氧化活性.本研究仅挑选了具有代表性的4个品种的牡丹,在数量和范围上还存在必然局限性,还有待于此后不断补充和完善.【参考文献】1刘亚丽,刘蕾,王荣峰.STS、PP333对牡丹切花保鲜及某些生理特性的阻碍J.吉林农业大学学报,2022,27(3):276.2彭长连,陈少薇,林植芳,等.用有机自由基DPPK评判植物抗氧化水平J.生物化学与生物物理进展,2000,27(6):658

11、.3张尔贤,俞丽君,周意琳,等.Fe2+诱发脂蛋白PUFAt氧化体系及对假设干天然产物抗氧化产物抗氧化作用的评判J.生物化学与生物物理学报,1996,28(2):218.4李娟,李平,卜可华.几种牛肝菌抗氧化水平的研究J.中国食物添加剂,2022,1:49.5WettasingheM.,ShahidiofreactiveoxygenspeciesandDPPHreeradicalsbyextractsofborageandeveningprimrosemealsJ.FoodChemistry,2000,70： 17.6曾佑炜,徐良雄,彭永宏.45种花卉去除自由基水平的比拟J.生物与环境生物报,2022,10(6):699.7廖立新,彭永红,李玲.35种鲜花的抗氧化活性J.植物资源与环境学报,2022,11(2):21.LISHIZHENMEDICINEANDMATERIAMEDICARESEARCH2022VOL.21时珍国医国药2022年第21卷第4期